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植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒說明書

提 供 商: 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司 資料大小:
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詳細(xì)介紹

可見分光光度法

植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒說明書 貨號(hào):YJS2309

規(guī)格:50T/24S

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:60%乙醇, 自備。

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,4℃保存。1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說明:

植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而 廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。


在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在 760nm 處有特征吸收峰,測(cè) 760nm 處的




吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。

操作步驟:

一、總酚提取

將樣本烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩之后,稱取約 0. 1g ,加入 2.5mL 提取液,用超聲提取法進(jìn) 行提取,超聲功率 300W ,破碎 5s ,間歇 8s 60 , 提取 30min 12000rpm 25 , 離心 10min  取上清,用提取液定容至 2.5mL ,待測(cè)。

二、標(biāo)準(zhǔn)品制備

 1mg/mL 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)溶液二倍稀釋至 0.31250.15620.07810.03910.01950.00980.0049 0.0024 0.0012 0.0006mg/mL ,待測(cè)。

三、測(cè)定操作表

1 、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 760nm ,蒸餾水調(diào)零。

2 、操作表


對(duì)照管

測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣本待測(cè)液 ( μL)

50

50


-

標(biāo)準(zhǔn)液 ( μL)



50


蒸餾水 ( μL)




50

試劑一 ( μL)

-

250

250

250

混勻,室溫靜置 2min

試劑二 ( μL)

250

250

250

250

蒸餾水 ( μL)

700

450

450

450

混勻,室溫靜置 10 min, 1mL 比色皿,測(cè)定 760nm 吸光值。

空白管只測(cè)一次。

四、總酚含量計(jì)算


1 、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:

以不同濃度的單寧酸為 軸,ΔA標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)為 y  軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 y= kx+b

2 、植物總酚含量計(jì)算:

ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線,求 x(mg/mL)

(1) 按樣本鮮重計(jì)算


總酚含量(mg/g  鮮重)= x×V 提取÷W= 2.5x÷W (2) 按樣本






蛋白濃度計(jì)算


總酚含量(mg/mg prot= x×V 提取÷V 提取×Cpr= x ÷Cpr

提取:提取液體積,2.5 mLCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣品質(zhì)量g

注意事項(xiàng):

(1)OD 值大于 1.0 ,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

(2)試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。


本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途

從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):




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